AFLPとRFLPの違い| AFLPとRFLP

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aflp特徴、rflp特徴、制限断片長多型、増幅断片長多型、主要な違い - AFLPとRFLP

DNA研究は、系統関係の理解と決定、遺伝病の診断、および生物のゲノムマッピングに非常に重要です。 DNA分析に関連するいくつかの技術は、未知のDNAのプール中の特定の遺伝子またはDNA配列の同定にも使用される。それらは分子マーカーとして知られています。生物間の遺伝的変異を検出するために、分子生物学で開発された2つの分子マーカー(方法)が、増幅された断片長多型(AFLP)および制限断片長多型(RFLP)である(999)。どちらの方法も同様に重要であり、長所と短所があります。 AFLPとRFLPとの主要な違いは、AFLPは消化されたDNAの選択的PCR増幅を伴うが、RFLPはDNA断片の選択的PCR増幅を伴わないことである。 目次 1。概要と主な相違点 2。 AFLPとは何か? 3。 RFLPとは何ですか?

4。サイドバイサイド比較 - AFLP対RFLP

5。要約

AFLPとは何ですか? AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism)は、分子生物学における重要なツールであり、遺伝子変異解析に広く用いられている。 AFLPは、断片化されたゲノムDNAの特異的PCR増幅およびゲル電気泳動によるオートラジオグラフによる多型の検出に基づく。 AFLPは、植物、動物、細菌および真菌を含む様々な王国の菌株または密接に関連する種の遺伝的差異の同定に広く寄与する。 AFLPは、少量の未知のDNAサンプルで実施することができる。これは、プローブの以前の配列知識および設計を必要としない。

<! DNAの単離制限エンドヌクレアーゼによるDNAの消化

制限されたDNA断片のアダプターによるライゲーション

特定の制限を有する断片の選択的増幅サイトゲル電気泳動によるPCR産物の分離

オートラジオグラフによるゲルマトリックスの可視化

AFLPは、真菌、細菌、植物および植物を含むいくつかの分類群のDNAプロファイリングに使用できる、より感度が高く再現性のある方法である。 DNA配列の事前知識なしに動物に投与することができる。それは、その非常に敏感な性質のために集団における個体間のわずかな差異を同定するのに役立つ。 AFLPはまた、ゲノムマッピング、法医学的試験、親の試験、ジェノタイピングなどにおいても重要である。

図01:AFLP

RFLPとは何ですか?制限フラグメント長多型(RFLP)は、相同なDNA配列の遺伝的変異を検出するために使用される技術である。DNAプロファイリングのために開発された最初の方法です。生物には独自のDNAフィンガープリントやDNAプロファイルがあります。相同配列は特定の生物に特有の異なる制限部位(位置)を有するため、RFLPは、種間または密接に関連する生物のDNAプロファイル間の変異を分析するための重要なツールとして役立つ。同種のDNAが特定の制限エンドヌクレアーゼで消化されると、個々の個体に固有の異なるDNAプロファイルが得られる。したがって、この方法の原理は、相同なDNAを特定の制限酵素で制限し、ゲル電気泳動およびブロッティングによる断片長多型の分析によって、生物間の遺伝的変異の検出である。ブロッティングパターンは、各生物に固有であり、特定の遺伝子型を特徴付ける。 RFLPのステップ

サンプルからの十分な量のDNAの単離

特定の制限エンドヌクレアーゼを有するDNAサンプルの短い配列への断片化。アガロースゲル電気泳動による、異なる長さの得られた断片の分離。サザンブロッティングによる膜へのゲルプロフィールの移動

  1. 標識されたプローブとの膜のハイブリダイゼーションおよび各プロファイルにおけるフラグメント長多型の分析

    RFLPは、疾患継承を検出し、家族の間で病気の発生のリスク。 RFLPはまた、ゲノムマッピング、犯罪者の法医学、親子鑑定テストなどで頻繁に使用されています。RFLPにもいくつかの制限があります。 RFLPは、ハイブリダイゼーションのためのプローブを設計するための配列データの事前知識が必要です。また、法医学的研究では困難である分析する試料から十分な量のDNAを単離することも必要である。

  2. 図01:RRFLPマッピング
  3. AFLPとRFLPの違いは何ですか?
  4. <! AFLPは、消化されたDNAの選択的PCR増幅を含む。
  5. RFLPは、PCR-RFLPでない限り、PCRに関与しない。
  6. 配列知識

事前配列知識は必要ではない。

RFLPプローブを設計するには、事前の配列知識が必要です。

信頼性

これはより信頼性が高い。

これはAFLPと比較して信頼性が低い。

多型検出効率>これは、RFLPよりも多型の検出効率が高い。

  1. これはAFLPに比べて効率が悪い。
  2. 費用
  3. これはRFLPに比べて少し高価です。
  4. これはAFLPに比べて安価です。
  5. AFLPはゲノムマッピング、DNAフィンガープリンティング、遺伝的多様性研究、父親検査、法医学に応用されています。

RFLP解析はゲノムマッピング、遺伝子異常の遺伝子のローカリゼーション、病気、および父親の検査。要約 - AFLPとRFLP AFLPとRFLPは、分子生物学における遺伝的関係の多様性と評価の評価のための遺伝的マーカーとして用いられる2つの技術である。AFLPは、生物間の遺伝的多型をRFLPよりも効率的かつ高感度に検出する方法として役立つ。しかしながら、これらの方法の両方は、遺伝子変異の検出において異なる効率を有するけれども、DNAフィンガープリンティングおよび疾患診断に依然として使用されている。

リファレンス:

1。 Garcia、Antonio A. F.、Luciana L. Benchimol、AntôniaM. M. Barbosa、Isaias O. Geraldi、Souza Jr. Claudio L.、およびAnete P. De Souza。 "熱帯性トウモロコシ近交系の多様性研究のためのRAPD、RFLP、AFLPおよびSSRマーカーの比較。 "遺伝学と分子生物学。 Sociedade Brasileira de Genetica、2004. Web。 2017年3月19日

2。 "制限断片長多型(RFLP)。 "国立バイオテクノロジー情報センター。米国国立医学図書館、n。 d。ウェブ。 2017年3月19日

3。 Masiga D. K.およびTurner C. M.(2004)。 「増幅された(制限)断片長多型(AFLP)分析」。 Methods Mol Biol:270:173-86。 NCBI。ウェブ。 2017年3月19日

画像提供: 1。 "ALFP" Barberrossa提供:オランダ語Wikipedia - nlから転送。ウィキペディアからコモンズCommons Wikimedia経由で(パブリックドメイン)
2。 "RFLPマッピング" Commons Wikimedia経由のRetama - Own work(GFDL)By